根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標準,JS-G基因擴增儀分為普通基因擴增儀,梯度基因擴增儀,原位基因擴增儀,實時熒光定量基因擴增儀四類,下面我們就來看下他們具體的特色:普通的JS-G基因擴增儀:把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀,叫傳統(tǒng)的PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是做簡單的,對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應(yīng)用于科研研究,教學(xué),醫(yī)學(xué)臨床,檢驗檢疫等機構(gòu)。梯度JS-G基因擴增儀:把一次性pcr擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR因為被擴增的不同DNA片段,其zui適退火溫度不同,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的zui適退火溫度,進行有效的擴增。
原位JS-G基因擴增儀:用于從細胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細胞內(nèi)基因擴增儀,如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內(nèi)的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增,不但可以檢測到靶DNA,又能標出靶序列在細胞內(nèi)的位置,于分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值。實時熒光定量PCR基因擴增儀:在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀。
雖然JS-G基因擴增儀的生產(chǎn)廠家、型號很多,工作原理不盡相同,使用方法也不盡一致,但都具有向自動化和智能化發(fā)展的趨勢,這對于使用者來說比較方便,只要參考說明書輕輕觸動鍵鈕,輸入或改變擴增程序、反應(yīng)時間、溫度等,置入擴增樣品,PCR基因擴增儀就會自動完成整個擴增過程。
JS-G基因擴增儀適用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領(lǐng)域以聚合酶鏈式反應(yīng)為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。
JS-G基因擴增儀的日常維護保養(yǎng)工作:
1、樣品池的清洗
先打開蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運行,讓殘余液體揮發(fā)去除,一般5~10min即可。
2、熱蓋的清洗
對于熒光定量基因擴增儀,當(dāng)有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來自樣品池時,或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無污物阻擋光路。
3、儀器外表面的清洗
清洗JS-G基因擴增儀的外表面可以除去灰塵和油脂,但達不到消毒的效果,選擇沒有腐蝕性的清洗劑對基因擴增儀的外表面進行清洗。
4、更換保險絲
先將基因擴增儀關(guān)機,拔去插頭,打開電源插口旁邊的保險盒,換上備用的保險絲,觀察是否恢復(fù)正常。
溫度控制是決定PCR反應(yīng)能否成功的關(guān)鍵,主要包括溫度的準確性、均一性以及升降溫速度。對梯度基因擴增儀來說,還必須考慮JS-G基因擴增儀在梯度模式和標準模式下是否具有同樣的溫度特性。實時熒光定量JS-G基因擴增儀均有熒光檢測系統(tǒng),主要包括激發(fā)光源和檢測器。簡便的人性化設(shè)計能滿足其需求。多樣化樣品基座設(shè)計、熱蓋等都使基因擴增儀越來越人性化。
JS-G基因擴增儀為您分析不同的類型的儀器各有什么不同的特點:
1、金屬板式實時定量基因擴增儀,還可作為普通PCR儀使用,有的甚至帶梯度功能,可容納的樣本量大,無需特殊耗材,但溫度均一性欠佳,有邊緣效應(yīng),標準曲線的反應(yīng)條件難以做到與樣品*一致。
2、離心式實時定量基因擴增儀的PCR擴增樣品槽被設(shè)計為離心轉(zhuǎn)子,溫度均一性好,但可容納樣品量少,有的需用特殊毛細管作樣品管,增加了使用成本,也不帶梯度功能。
3、各孔獨立控溫的定量基因擴增儀的不同樣品槽分別擁有獨立的智能升降溫模塊,各孔獨立控溫,適合多指標快速檢測,可實現(xiàn)任意梯度反應(yīng),但上樣不如傳統(tǒng)方法方便,而且需要*的扁平反應(yīng)管,使用成本較高。
PCR基因擴增儀適用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領(lǐng)域以聚合酶鏈式反應(yīng)為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。
根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標準,JS-G基因擴增儀分為普通基因擴增儀,梯度基因擴增儀,原位基因擴增儀,實時熒光定量基因擴增儀四類,下面我們就來看下他們具體的特色:
1、普通的JS-G基因擴增儀:把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀,叫傳統(tǒng)的PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是做簡單的,對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應(yīng)用于科研研究,教學(xué),醫(yī)學(xué)臨床,檢驗檢疫等機構(gòu)。
2、梯度JS-G基因擴增儀:把一次性pcr擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,其適退火溫度不同,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的適退火溫度,進行有效的擴增。
3、原位JS-G基因擴增儀:用于從細胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細胞內(nèi)基因擴增儀,如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內(nèi)的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增,不但可以檢測到靶DNA,又能標出靶序列在細胞內(nèi)的位置,于分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值。
4、實時熒光定量PCR基因擴增儀:在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這JS-G基因擴增儀叫做實時熒光定量PCR儀。